bend牛子宫内膜上皮细胞系
【细胞货号】 c0122
"选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。
瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀小心勿造成气泡，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指56℃，30分钟加热已完全解冻之血清。bend牛子宫内膜上皮细胞系水浴锅升到56℃后，将血清放入，待温度升高到56℃后计时，一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清包括不同批次对细胞的影响。【细胞缩写】" bend细胞
【细胞名称】 bend(牛子宫内膜上皮细胞)
【背景资料】 见细胞说明书
【细胞来源】 细胞主要来源atcc、dsmz、ecacc、riken、promocell、sciencell、ecacc、jcrb、kclb、asterand、iclc以及少数国内外著名大学建系
【代次】 p4
【规格】 复苏t25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）
"细胞冻存及复苏基本知识普及：
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。
除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜dmso，可使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。
采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min，当温度低于-25℃时可加速，到-80℃之后可直接投入液氮内-196℃。【细胞数】" 1*10（6）
【生物安全级别】 1
【生物体】 牛
【组织来源】 子宫
【细胞形态】 上皮细胞样
【细胞特性】 贴壁
【细胞活力】 95％（viability by trypan blue exclusion）
【细胞检测】 细胞不含有hiv-1、hbv、hcv、支原体、细菌、酵母和真菌
"细胞常规培养传代流程请严格遵照无菌操作
1、吸出原培养瓶中的培养基，pbs缓冲液润洗细胞两次，加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞注意把握消化时间，通常控制在1-2min
2、镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时不建议消化到细胞漂浮去掉胰酶，加6-8ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养
4、注意培养基ph值变化情况，定期换液每周2-3次，待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
特别注意：如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养
1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清，原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时
2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养
3、如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。【培养条件】" 详见细胞说明书
【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】 详见细胞说明书
【主要文献】 请具体查阅相关发表文章
有关实验室细胞培养基知识普及：
经典的培养基有很多种，corning、invitrogen(gibco)、thermo fisher(hyclone)等公司都可以提供。其中dmem、rpmi 1640、mem、dmem/f12都是应用最广泛的培养基。其他如m199、imdm、l15培养基等也用于某些细胞的培养。
mem是由eagle’s基础培养基(bme)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度。
bem(dmem)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。dmem的氨基酸浓度是mem的两倍，维生素浓度是mem的4倍，bend牛子宫内膜上皮细胞系采用双倍的hco3-和co2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/l，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为4500 mg/l，这就是大家常说的低糖和高糖了。
amem含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞。
ham’s f12是为在低血清浓度下克隆cho细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。f12还可以与dmem等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。
rpmi 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
干粉培养基：以前大部分实验室都是用干粉培养基，但配制过程就较为繁琐，要溶解、调ph值，过滤，过程中可能会产生一些浓度误差，而且有些实验室的水质并不理想，所以培养的效果会有差异。如果使用液体培养基，这种人为的误差会减少，因为毕竟是大批量工业化生产的，批间差会很小。大家是不是感觉液体培养基会贵很多，以前是这样，但现在大家都认同了。
无血清培养基(serum-free media)，通常以sfm表示，顾名思义，就是在细胞培养中不需要添加血清，但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等，能减少上述血清带来的不利因素，使细胞培养的条件更稳定。但它也不是完美的，从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方，对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时，也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用，因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外，它的价格也比普通的培养基贵很多。
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